جدا سازی و کشت اولیه سلول های اپی تلیال تیموس رت با استفاده از آنزیم اکتینیدین میوه کیوی

چکیده   زمینه و هدف : برای تجزیه ماتریکس خارج سلولی جداسازی و کشت اولیه سلولها از آنزیمهای پروتئولیتیک بخصوص کلاژناز برای هضم بافت استفاده می شود. یافتن پروتئاز جایگزین کلاژناز در منابع گیاهی یا جانوری که راحت تر و با هزینه کمتر تخلیص گردد، از اهمیت ویژه ای برخوردار است. به همین علت در مطالعه حاضر از آنزیم اکتینیدین که به وفور در میوه کیوی یافت می شود، جهت جداسازی سلولهای اپی تلیال تیموس موش صحرایی استفاده شد.   روش بررسی : آنزیم اکتیندین تخلیص شده از میوه کیوی در دامنه غلظت 1 تا 10 میلی گرم در میلی لیتر و زمان 3، 4 یا 5 ساعت برای جداسازی سلولهای اپی تلیال تیموس موش صحرایی استفاده شد و سلولهای اپی تلیال تیموس جداشده در پلیت کلاژن دار همراه محیط کشت willams e کشت داده شدند. درصد زنده ماندن سلولهای اپی تلیال با استفاده از تست تریپان بلو و مرفولوژی سلولها در مراحل کشت پس از رنگ آمیزی پاپا نیکولا بررسی شد.   یافته ها : اکتینیدین در غلظت 4 میلی گرم در میلی لیتر در مدت زمان 4-5/3 ساعت ماتریکس خارج سلولی تیموس موش بزرگ را هضم و سلولهای اپی تلیال تیموس را بطور مطلوب جدا نمود. درصد بقای سلولهای جدا شده 95-90 درصد تخمین زده شد.   نتیجه گیری : آنزیم اکتینیدین میوه کیوی در مقایسه با کلاژناز، پروتئاز مناسبی برای جداسازی سلولهای اپی تلیال تیموس موش و احتمالاً سایر حیوانات است. لذا با توجه به سادگی و کم هزینه بودن اکتینیدین، این آنزیم جایگزین مناسبی برای کلاژناز به هدف جداسازی سلولهای اپی تلیال تیموس و کشت این سلولها است.